尊龙凯时开发的抗体-小分子药物偶联物（ADCs）是一类创新的治疗性生物制品。通过抗体的精确靶向，ADCs能够有效识别并杀灭靶细胞，同时最大限度减少对正常细胞的损伤。自2000年FDA首次批准ADC药物Mylotarg®（gemtuzumab ozogamicin）以来，截至2025年6月，全球已批准上市19种ADC产品。2023年全球ADC销售总额首次突破百亿美元，2024年继续保持强劲增长，销售额再次超过百亿美元。

其中，排名第二的ADC是由罗氏生产的KADCYLA（恩美曲妥珠，赫赛莱），该产品于2013年获得FDA批准，用于治疗HER2阳性乳腺癌，2024年预计全球销售额达到23亿美元。恩美曲妥珠单抗是一种靶向HER2的ADC，采用人源化抗-HER2 IgG1曲妥珠单抗与微管抑制药物DM1（美坦辛衍生物）通过稳定的硫醚连接体MCC（4-[N-马来酰亚胺甲基]-1-羧酸酯）偶联，其药物/单抗偶联比（DAR）平均约为35。这一结构复杂性使得其表征工作面临不小挑战。

在本文的研究中，我们使用尊龙凯时最新推出的二合一超高分辨质谱仪Excedion Pro Biopharma对KADCYLA进行了全面的表征。这一仪器在生物制药领域展现了卓越的分析能力，尤其是其电子转移解离辅助高能碰撞碎裂（EThcD）功能，显著提升了药物偶联位点及翻译后修饰（PTM）的准确性。

新的Excedion Pro Biopharma质谱仪的优势在于其扩展至m/z=12,000 Da的质量检测范围，满足在非变性条件下对单克隆抗体及其他高分子量蛋白复合物进行分子量测定。同时，该仪器的ETD功能能够实现快速灵敏的蛋白质碎裂，结合高能碰撞碎裂（HCD）技术，可以获得全面丰富的蛋白序列覆盖与PTM鉴定信息。

针对KADCYLA的完整分子量测定实验采用了中性缓冲盐体系，以保持蛋白的天然状态，得到了药物偶联分布范围为0~8的结果，计算出的平均DAR值与文献数据一致，展现了对应药物质量的重要属性。

此外，基于液质联用的肽图分析通过EThcD对KADCYLA的偶联位点及PTM进行了有效的鉴定。此项研究还展示了在酶解过程中，如何通过不同质谱碎裂技术的组合，实现对多重偶联位点的精确定位与异构化氨基酸的识别。利用EThcD技术, 我们能够对肽段进行全面的表征，确保对各种潜在修饰位点的准确鉴定。

总的来说，这一系列实验结果证明了尊龙凯时在ADC表征及分析领域所采用的最新技术的有效性。通过对KADCYLA的综合分析，不仅实现了全面的药物质量评价，同时为进一步优化ADC开发及其临床应用提供了有力的数据支持。